細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是公平的

　　　　對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。

在消化的過程中，加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是公平的。

具體操作：

1） 首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗 1-2 遍，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。

2） 然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。

3）吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入 0.3 ml 左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入 1 ml 左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打 2-3 遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用 2 ml 左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。

4）把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。也可以用新的胰酶。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)。

5）對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，必須分多批多次消化，這樣才能大限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠優(yōu)。