在ELISA試劑盒試驗(yàn)中是非常重要的，想搞定教您幾個(gè)好辦法！

　　　常有ELISA操作員反映在標(biāo)本保存時(shí)出現(xiàn)溶血、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生，ELISA試劑盒標(biāo)本保存，在ELISA試劑盒試驗(yàn)中是非常重要的，我公司技術(shù)員特針對(duì)相關(guān)常見問題做出總結(jié)。

一、標(biāo)本管中增加物質(zhì)的影響

    抗凝劑、酶抑制劑及快速分別血清的分別膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有必定煩擾作用。

二、標(biāo)本凝集不全

    在沒有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下，正常血液搜集后1/2~2h初步凝聚，18~24h完全凝聚。臨床查驗(yàn)工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)刻快速檢測(cè)，常在血液還未初步凝聚時(shí)即強(qiáng)行離心分別血清，此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過程中可以構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊，易形成假陽(yáng)性作用；這類狀況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已完全，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查作用變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜鰺_作用，處理的辦法zui好是血液標(biāo)本搜集后有必要使其充沛凝聚后再分別血清，或標(biāo)本搜集時(shí)用帶分別膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>

三、標(biāo)本保存不妥

    在冰箱中保存過久的標(biāo)本，血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、乃至形成假陽(yáng)性；標(biāo)本放置時(shí)刻過長(zhǎng)（如一天以上），有時(shí)抗原或抗體免疫活性削弱，亦可出現(xiàn)假陰性。為打敗上述煩擾，ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮搜集；如不能立即測(cè)定，5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充沛混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不行激烈振蕩。

四、標(biāo)本溶血

    由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號(hào)的ELISA測(cè)定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色，ELISA試劑盒煩擾測(cè)定作用。為打敗上述煩擾作用，標(biāo)本搜集時(shí)有必要留意避免溶血。

五、標(biāo)本受細(xì)菌污染

做好了ELISA試劑盒要素和操作要素之后，確保檢測(cè)作用的準(zhǔn)確性就簡(jiǎn)單的多了。我公司試劑盒供給全程輔導(dǎo)服務(wù)，為您的試驗(yàn)擔(dān)任究竟！

因菌體中或許含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而煩擾測(cè)定作用。歡迎您laidian咨詢我司業(yè)務(wù)員。