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蕎麥源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法反應五要素

發表時間:2022-08-15 16:52

蕎麥源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法反應五要素:


參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:


①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。


②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。


③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。


⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。


⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。


⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。


引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

甲胎蛋白抗體alpha 1 Fetoprotein

毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體ATM

ATP結合盒轉運蛋白2抗體ABCF2

肌動蛋白結合蛋白LIM蛋白3抗體ABLIM3

酸性鈣調蛋白3抗體Acidic Calponin

磷酸化CD156b抗體phospho-ADAM17 (Thr735)

乙醇脫氫酶5抗體ADH5

乙醇脫氫酶6抗體ADH6

溶血磷脂酰基轉移酶5抗體AGPAT5

遺傳性失明相關蛋白AIPL1抗體AIPL1

免疫調節蛋白AIRE抗體AIRE

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Ser473)

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Thr72)

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Tyr326)

乙醛脫氫酶2型抗體ALDH1A2

γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體ALDH9A1

衰老相關蛋白5抗體AGPS

磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質/α-晶體蛋白b鏈抗體phospho-alpha B Crystallin (Ser59)

釉基質蛋白抗體AMBN

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser515)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser791)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser94)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Tyr363)



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