產品介紹

細胞名稱：EB病毒轉化的人B淋巴細胞

形態特性：淋巴母細胞樣

生長特性：懸浮生長

特征特性：該細胞系來源于一無精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。

培養條件： RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法： 1：

2傳代；5-6天一次  

傳代情況： P2

凍存條件：基礎培養基+5%DMSO+20%FBS　

細胞冷凍保存：

1.凍存液：92%完全培養基+8%DMSO（可以根據實驗室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。

細胞培養的操作步驟：

1.EB病毒轉化的人B淋巴細胞吸走用于培養基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面，培養瓶放37度培養箱消化；

（細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態，導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3.加入6-8ml完全培養基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；

4.將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養；

傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。