產(chǎn)品介紹
細胞名稱：人肺巨細胞癌高轉移系
形態(tài)特性：上皮細胞樣
生長特性：貼壁生長
特征特性： PGBE1由朱偉勇和鄭杰于1995年建系。源自人肺巨細胞癌系分離了多個單細胞克隆，經(jīng)體外侵襲實驗和裸鼠體內(nèi)接種相結合進行了初步鑒定后，挑選其中３個克隆化細胞亞系之一。該細胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤率均為１００％，淋巴結轉移率為９４％。
培養(yǎng)條件： MEM-EBSS：
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法： 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況： C7
凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
產(chǎn)品名稱 | 人肺巨細胞癌高轉移系 |
英文簡稱 | PGBE1 |
狀態(tài) | 貼壁 |
細胞冷凍保存：
1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。
細胞培養(yǎng)的操作步驟：
1.人肺巨細胞癌高轉移系吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞；
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài)，導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；
4.將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
